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高效液相色谱柱重复性差、不出峰、回收率低该怎么处理?
2020-07-02 13:16

高效液相色谱柱的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。今天小编就讲讲高效液相色谱柱的故障排除方法:
1、重复性差、不出峰、回收率低
可能是色谱柱被污染,流动相pH值或者组成不合适造成固定相损失,样品溶剂不同或样品本身不稳定,固定相极性过强或者流动相极性过弱.或者发生非特异性吸附。也可能梯度实验时平衡时间不足,温度波动,流动相组成改变,样品溶剂不同,样品稳定性不好,方法的开发不好,缓冲液的酸碱度不合适或者缓冲能力不足。
2、柱压过高
可能是微粒堵塞.柱床膨胀,不可逆吸附,细菌生长等造成的。也有可能是系统反压问题,例如阻尼器堵塞,进样器堵塞,管路或连接口堵塞。在线过滤器不干净,压力传感器不准确等。
3、柱效低
可能是色谱柱被污染、过滤片部分堵塞、色谱柱内的死体积造成,例如流动相pH值或者组成不合适造成固定相损失。流动相急剧变化造成固定相物理损坏,机械振动造成固定相产生裂缝,柱床收缩或干枯。也有可能是仪器连接的问题,认真检查进样器、检测器、管路、保护柱和在线过滤器等是否连接好,也可能是色谱柱没有平衡好,进样量过大等问题。
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